Técnicas de Laboratório em Biologia II
Código
8143
Unidade Orgânica
Faculdade de Ciências e Tecnologia
Departamento
Departamento de Ciências da Vida
Créditos
6.0
Professor responsável
Ana Madalena Peres de Drumond Ludovice Mendes Gomes, Rita Gonçalves Sobral Almeida
Horas semanais
5
Total de horas
68
Língua de ensino
Português
Objectivos
No fim do semestre está previsto que os alunos tenham adquirido as seguintes competências: (1) Descrever e explicar as bases moleculares associadas às diversas técnicas abordadas durante o curso. (2) Distinguir e descrever as diversas técnicas de biologia molecular que são utilizadas para isolar, purificar e caracterizar ácidos nucleicos (princípios de electroforese em gel (agarose), mapas de restrição, PCR, hibridação in situ de ácidos nucleicos e imunocitoquímica). (3) Comparar e contrastar as diferentes metodologias descritas ao longo do curso. Associar criticamente estas diferenças ao objectivo final pretendido. (4) Diante de uma questão biológica específica, identificar a abordagem experimental que melhor se adequa à resolução do problema. (5) Analisar e interpretar resultados experimentais de forma crítica e clara. Apresentar os resultados sob a forma de um relatório científico. (6) Assimilar a importância da evolução técnica ao longo dos anos, como as metodologias estão limitadas tecnicamente pelo conhecimento do momento. (7) Perceber que a biologia molecular e celular é uma área em constante atualização, sempre na fronteira dos últimos avanços a nível experimental. (8) Adquirir competências necessárias para subsequentemente frequentar as Unidades Curriculares de Genética Molecular e Engenharia Genética.
Pré-requisitos
Recomenda-se fortemente a frequência e aprovação nas disciplinas de Técnicas Laboratoriais de Biologia I e Biologia Celular.
Conteúdo
Introdução aos laboratórios de biologia molecular. Principais riscos associados e protocolos de segurança.
1. Técnicas de Biologia Molecular
- métodos de extracção e purificação de ácidos nucleícos.
- análise quantitativa e qualitativa de ácidos nucleicos.
- electroforese de ácidos nucleicos.
- introdução aos métodos de sequenciação de DNA.
- restrição enzimática e mapas de restrição para análise genética.
- análise por PCR – escolha de primers e condições de reacção.
- transformação de bactérias com moléculas de DNA plasmídico.
2. Técnicas Cito-Moleculares
- métodos de fixação e tratamento de amostras para histologia;
- técnicas de coloração em histologia;
- elaboração de preparações para microscopia;
- hibridação in situ de ácidos nucleicos.
- introdução à microscopia de epifluorescência.
Análise de casos-de-estudo de biologia molecular aplicados à análise genética.
Bibliografia
- Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Walter, P. Molecular Biology of the Cell. 6th ed. Garland Science, New York, USA, 2008.
- Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., Jones, A. Practical Skills in Biomolecular Sciences. 2nd ed. Pearson Education Limited, Essex, UK, 2003.
- Cantor, C.R. and Smith, C.L. Genomics: The Science and Technology Behind the Human Genome Project. John Wiley & Sons, 1999.
- Sambrook J., and D. W. Russell. (2001) Molecular Cloning - A Laboratory Manual. 3rd Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press. New York.
- Protocolos detalhados para cada sessão laboratorial.
- Artigos científicos.
Método de ensino
A componente teórico-prática integra o enquadramento teórico das técnicas, metodologias e concepção experimental.
O curso prático de TLB II decorre em laboratório, com acompanhamento e execução de experiências essenciais no uso directo de técnicas moleculares e cito-moleculares. Integra igualmente a análise e discussão dos resultados obtidos.
Método de avaliação
Para ter acesso a avaliação, o aluno tem de assistir a 2/3 das aulas práticas, correspondendo a 8 das 13 aulas previstas.
A Classificação Final da disciplina é obtida considerando:
- Um relatório escrito relativo ao primeiro trabalho experimental, realizado por cada grupo. A avaliação deste relatório contribui em 15% para a classificação final (3/20 valores).
- Dois mini-testes a realizar durante as aulas teórico-práticas, cada um contribuindo em 10% para a classificação final (2/20 valores cada mini-teste).
- O desempenho laboratorial ao longo do semestre contruirá em 5% para a classificação final (1/20 valores).
- Dois testes parciais ou Exame de Recurso sendo os conteudos em avaliação as matérias teóricas e práticas, contribuirão em 60% para a classificação final (12/20 valores).